Explicació detallada de la volatilització del reactiu en experiments de PCR

Explicació detallada de la volatilització del reactiu en experiments de PCR.

A l'experiment PCR, després d'afegir el sistema de reacció, cobrim detingudament la tapa i confirmem repetidament que la tapa està tancada per evitar la volatilització del reactiu. Però de vegades també tenim dubtes: hem confirmat que la tapa està ben tancada, però un cop finalitzada l’experiment, el reactiu encara s’evaporarà. quin és el motiu?

De fet, la volatilització del reactiu és un dels problemes més habituals en els experiments de PCR, i hi ha molts factors que afecten la volatilització del reactiu.

L’evaporació es refereix a la que durant l’experiment PCR, la solució de reacció s’evapora a alta temperatura i, després en un canvi en la concentració de la solució de reacció. Els canvis, la quantitat de solució de reacció va disminuir i alguns fins i tot es van evaporar fins a la sequedat, donant lloc a experiments no vàlids.

1. Pressió de la tapa calenta, temperatura

En els experiments de PCR, normalment escalfem la tapa per evitar la condensació del vapor de reactiu. La temperatura de la tapa escalfada sol ser superior a la de la solució de reacció per evitar la condensació de vapors.

Les tapes de calefacció del ciclista tèrmic es poden dividir aproximadament en els quatre tipus següents: tapes de calefacció no ajustables, tapes de calefacció regulables, tapes de calefacció adaptativa i tapes de calefacció automàtica. La tapa escalfada ajustable presenta una compressió hermètica. Si no s’estrenyen fortament, els reactius s’evaporaran. L’evaporació de la vora es pot minimitzar augmentant la pressió sobre la tapa escalfada. De vegades, la superació pot pessigar el tub i torçar el pom. En circumstàncies normals, la cobertura de calefacció intel·ligent elèctrica pot detectar automàticament els consumibles de diferents altures, comprimir automàticament els consumibles, i la pressió és uniforme i constant, reduint així l’evaporació de reactius i els errors manuals i millorant la precisió i la repetibilitat experimentals.

2. deformació dels consumibles

Per a les fuites de vapor, la majoria de la gent pensa que la pressió de la tapa calenta no és suficient. La pressió de la tapa calenta és molt important, però només és un aspecte. De fet, els consumibles també són molt importants.

Les plaques d’orifici PCR solen ser de materials plàstics, que s’expandeixen i es deformen molt després d’escalfar -se. La velocitat d’expansió tèrmica de la base metàl·lica PCR utilitzada per situar la placa d’orifici PCR és extremadament baixa i la placa d’orifici PCR no es pot expandir normalment al llarg del pla després de l’expansió tèrmica. L’estat voluminós fa que la coberta de calor superior sigui incapaç de contactar completament amb la superfície de la placa d’orifici de PCR, donant lloc a una temperatura i pressió desiguals, provocant evaporació de reactius a la vora de la placa d’orifici PCR i afectant l’efecte de detecció de PCR.

3. Els consumibles no estan ben segellats

La tensió de la tapa tèrmica i els consumibles no significa que la tapa del tub de PCR estigui ben tancada i la qualitat de la placa del pou de PCR sigui desigual. Els consumibles d’alta qualitat, la superfície de la boquilla i la coberta són suaus, i el segell que hi ha darrere de la coberta és bo i no és fàcil de filtrar. Els consumibles inferiors tenen brots desiguals i línies radials, cosa que pot causar fuites o fins i tot assecar -se.

Per tant, en els experiments de PCR, intenteu triar consumibles d’alta qualitat i adequats. Al mateix temps, el sistema de reacció es pot ampliar per minimitzar la influència de l’evaporació del sistema en la reacció.